جداسازی و شناسایی آسپرژیلوس فومیگاتوس در نمونه های لاواژ برونکوآلوئولار (bal) مشکوک به سل به روش nested-pcr

زمینه و اهداف: آسپرژیلوس فومیگاتوس عامل بیش از 90% آسپرژیلوزیس مهاجم حاد ریوی است. هدف از مطالعه حاضر شناسایی و ردیابی آسپرژیلوس فومیگاتوس در نمونه های لاواژ برونکوآلوئولار (bal) مشکوک به سل به روش nested-pcr است. مواد و روش کار: در این بررسی، در طی 9 ماه در طول سال های 92-91 تعداد 100 نمونه bal از بیماران بستری و مراجعه کننده به بیمارستان آموزشی در شمال تهران جمع آوری گردید، آزمایش مستقیم، کشت و pcr بر روی نمونه های مورد مطالعه صورت گرفت، به منظور استخراج dna از روش دستی فنل –کلروفرم استفاده گردید. جهت انجام duplex pcr از پرایمرهای اختصاصی جنس آسپرژیلوس و پرایمرهای بتااکتین استفاده شد. به منظور شناسایی گونه آسپرژیلوس فومیگاتوس از یک جفت پرایمر داخلی(روش nested-pcr ) و جهت تایید، تعدادی از محصولات pcr تعیین توالی گردید. یافته ها: به روش pcr آسپرژیلوس در 12 نمونه(12%) تشخیص داده شد، موارد مثبت در روش مستقیم و کشت به ترتیب 11% و 10% بود. حساسیت و اختصاصیت روش مولکولی pcr در مقایسه با آزمایش مستقیم به ترتیب 100% و 8/98% بود. همچنین حساسیت و اختصاصیت این روش در مقایسه با کشت به ترتیب 100% و 7/97% محاسبه گردید. نتایج تعیین توالی تعدادی از محصولات pcr وجود آسپرژیلوس فومیگاتوس را تایید نمود. نتیجه گیری: این مطالعه نشان داد که روش pcr، در مقایسه با روش مستقیم و کشت، حساسیت بالاتری در شناسایی و ردیابی آسپرژیلوس دارا می باشد، همچنین در نمونه های bal مشکوک به سل می توان آسپرژیلوس ها و به ویژه آسپرژیلوس فومیگاتوس را مدنظر قرار داد.